Selektive Lyse

wird im Hämatologieautomaten in den verschiedenen Messkanälen mit unterschiedlichen Lysepuffern genutzt.

Durch die selektive Lyse im WBC/Baso Kanal werden die Erythrozytenmembranen mit der Lyselösung zerstört. Die Erythrozyten sind dadurch aufgelöst und nicht mehr als Partikel zu detektieren. Die Zellmembranen der Neutrophilen, Eosinophilen, Lymphozyten und Monozyten nicht aber der Basophilen werden durch den Lysepuffer permeabilisiert und das Zytoplasma tritt aus. In der anschließenden Zellzählung werden die membranumhüllten Leukozytenkerne als kleine Partikel und die intakten Basophilen als größere Partikel gezählt.

Erythroblastenkerne werden in diesem Kanal als kleine Partikel den Leukozyten zugeordnet.



Abb. 4 WBC/Baso-Kanal Darstellung Vorwärtsstreulicht (FSC, Zellgröße) gegen Seitwärtsstreulicht (SSC, Granularität)
Alle anderen Leukozyten werden als deutlich kleinere Zellen detektiert (olive Punktewolke). Die lysierten Erythrozyten erscheinen als Zellschatten (Rauschsignal) in der linken unteren Ecke, blaue Punkte.

Durch die selektive Lyse im IMI Kanal (immature myeloic information) werden reife Leukozyten, Erythrozyten und Retikulozyten lysiert, sodass nur die unreifen Leukozyten gezählt werden. Reife und unreife Leukozyten unterscheiden sich in der Lipidzusammensetzung ihrer Zellmembran, die unreifen Leukozyten sind lyseresistent.



Abb. 5 Messung einer Blutprobe mit unreifen Granulozyten und Blasten, Lokalisation der verschiedenen Reifestufen im Scattergramm

Im Scattergramm (elektrischer Widerstand im Wechselspannungsfeld als Maß der Kern/Plasma Relation gegen Widerstand im Gleichspannungsfeld als Maß der Zellgröße) erscheinen die Kerne der lysierten reifen Leukozyten als blaue Punktewolke. Die nicht-lysierten unreifen Zellen (rote Punktewolke) sind größer als die lysierten Zellreste und bedingen damit ein stärkeres Signal im Gleichspannungsfeld. Die besonders unreifen Zellpopulationen weisen noch Proliferation und starke Proteinsynthese auf, aus diesem Grund sind die Blasten in der roten Punktewolke vor allem oben und die stabkernigen Neutrophilen mehr unten zu finden. Eine sichere Unterscheidung der verschiedenen Reifestufen ist in diesem Modus jedoch derzeit noch nicht möglich.

In diesem Kanal erkennt man Thrombozytenaggregate, siehe Abschnitt Fehlermöglichkeiten des kleinen Blutbildes.